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产品基本说明：
| 本试剂盒用于分离提取真核细胞的细胞膜蛋白、胞浆蛋白/核蛋白。 |
细胞膜蛋白、胞浆蛋白/核蛋白提取试剂盒
产品货号：26141
产品规格：50次/100次
产品简介：
本试剂盒用于分离提取真核细胞的细胞膜蛋白、胞浆蛋白/核蛋白。
产品内容：
产品名称 | 包装 | 储存条件 |
Harvest Buffer | 25ml/50ml (使用前加入25μl/50μl DTT溶液) | 4℃保存 |
Buffer A | 25ml/50ml (使用前加入25μl/50μl DTT溶液) | 4℃保存 |
Buffer C | 100ml/200ml (使用前加入100μl/200μl DTT溶液) | 4℃保存 |
DTT溶液 | 0.5ml/1ml | -20℃保存 |
操作步骤：
1. 收集106-5×106个细胞于1.5ml离心管中，用PBS清洗。
2. 将细胞重新悬浮于250-500μl Harvest buffer中，冰上孵育5min。
3. 1000rpm离心10min，收集上清至新离心管中，同时留沉淀。
4. 12000rpm离心15min，收集上清至新离心管中（此部分溶液包含胞浆蛋白和膜蛋白）。
5. 将步骤3中沉淀重悬于500μl Buffer A中，1000rpm离心5min，弃上清。
6. 加入4倍体积Buffer C，4℃涡旋（或反复涡旋/冰上孵育）15min。
7. 4℃，12000rpm离心10min。
8. 收集上清至新离心管中（此部分溶液包含核蛋白）。
注意事项：
1. 需自备PMSF。PMSF一定要在抽提试剂加入到样品中前2-3min内加入，以免PMSF在水溶液中很快失效。PMSF可以向本公司订购。
2. 抽提蛋白的所有步骤都需在冰上或4ºC进行。
3. 本试剂盒对于细胞样品，仅适合于真核细胞。
4. 使用本试剂盒抽提到的蛋白可直接用本公司生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。但不适合用Bradford法测定蛋白浓度。
5. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
6. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
产品介绍：
