同商品型号列表:
产品基本说明:
AMPPD是碱性磷酸酶的化学发光底物,在适宜的缓冲液中,随着酶的催化水解作用,AMPPD分解成AMP-D,后者发出强度很高的光信号,其发光的速度取决于碱磷酶的浓度。当碱磷酶偶合到杂交的探针时,便可以通过此系统检测到杂交分子的存在量。乙醇胺可使光信号输出更理想。AMPPD为1,2-二氧环已烷衍生物,它是一种生物化学领域中Γ新的超灵敏的碱性磷酸酶底物,其特点:反应速度快,在很短时间内提供正确可靠的结果。在它的分子结构中有两个重要部分,一个是联接苯环和金刚烷的二氧四节环,它可以断裂并发射光子;另一个是磷酸根基团,它维持着整个分子结构的稳定。在通常情冴下,这种化合物很稳定。但是,结果有碱性磷酸酶存在,Dioxetane Phosphate作为酶的底物会在酶的催化一脱去磷酸根基团,形成一个不稳定的中间体。这个中间体随即自行分解(二氧四节环断裂),同时发射光子。尚宝生物AMPPD发光显色试剂盒适用于PVDF膜,不推荐用于硝酸纤维素膜。 |
AMPPD发光显色试剂盒
产品货号:T15115
产品规格:25T/50T
产品简介:
AMPPD是碱性磷酸酶的化学发光底物,在适宜的缓冲液中,随着酶的催化水解作用,AMPPD分解成AMP-D,后者发出强度很高的光信号,其发光的速度取决于碱磷酶的浓度。当碱磷酶偶合到杂交的探针时,便可以通过此系统检测到杂交分子的存在量。乙醇胺可使光信号输出更理想。AMPPD为1,2-二氧环已烷衍生物,它是一种生物化学领域中Γ新的超灵敏的碱性磷酸酶底物,其特点:反应速度快,在很短时间内提供正确可靠的结果。在它的分子结构中有两个重要部分,一个是联接苯环和金刚烷的二氧四节环,它可以断裂并发射光子;另一个是磷酸根基团,它维持着整个分子结构的稳定。在通常情冴下,这种化合物很稳定。但是,结果有碱性磷酸酶存在,Dioxetane Phosphate作为酶的底物会在酶的催化一脱去磷酸根基团,形成一个不稳定的中间体。这个中间体随即自行分解(二氧四节环断裂),同时发射光子。尚宝生物AMPPD发光显色试剂盒适用于PVDF膜,不推荐用于硝酸纤维素膜。
产品组成:
产品名称 | 25T | 50T | 保存条件 | |
试剂(A): Dioxetane Buffer | A1: Dioxetane A | 50ml | 100ml | -20℃ |
A2: Dioxetane B | 50ml | 100ml | -20℃ | |
临用时,取A1、A2等量混合,即为Dioxetane Buffer,不可预先配制。 | ||||
试剂(B): AMPPD | 2.5mg | 5mg | -20℃,避光 |
自备材料:
1. 转印了蛋白并已以抗体-酶复合物检测过的PVDF膜。
2. Tris盐缓冲液(TBS)。
3. 透明的塑料保鲜膜。
4. 蒸馏水。
操作步骤(仅供参考):
1. 临用前,取适量的A1和A2,等量混合后获得Dioxetane Buffer。
2. 按2.5mgAMPPD溶于25ml Dioxetane Buffer, 配制0.1mg/ml AMPPD底物溶液即为AMPPD Dioxetane Buffer(发色发光显迹液),用于膜的染色。
3. 取适量Dioxetane Buffer洗膜两次,每次15min。
4. 对于PVDF膜进行的碱性磷酸酶反应, 膜置于新鲜配制的AMPPD Dioxetane Buffer作用5min。
5. 将膜移入适量的AMPPD Dioxetane Buffer中,浸泡5min(AP反应)。
6. 取出PVDF膜,滴干水分,将膜正面朝下放在一张透明的塑料保鲜膜上,向后折叠将膜包裹起来,成为不漏水的封闭体。
7. 在暗房中,将膜正面朝下放在感光胶片上,曝光数秒至数小时。
8. 如需要,在室温下以适量的TBS洗膜15min。
9. 将膜放入AMPPD Dioxetane Buffer,条带应在10~30min内出现。
10. 用蒸馏水洗膜,终止反应。晾干后拍照留永久的记录。
注意事项:
1. PVDF膜置于胶片上后,不要改变位置。
2. 曝光时间应根据实验情况,自行摸索。
3. 配制好的AMPPD Dioxetane Buffer,应避光低温保存。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:12个月有效。
产品介绍: