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产品基本说明:
吖啶橙( Acridine Orange,AO)属于三环杂芳香燃料,可以标记DNA、RNA,属于异染性荧光染料。该染料具有膜通透性,能透过细胞膜,使核DNA和RNA染色。因此AO常用于细胞内DNA和RNA进行检测。AO与核酸结合方式主要有:1、插入性结合,AO嵌入核酸双链的碱基对之间种结合方式主要为AO与DNA的结合,其荧光发射峰为530nm,激发后呈绿色荧光;2、静电吸引,带正电荷的AO与单链核酸的磷酸根(带负电荷)产生静电间的吸引结合,这种结合方式主要为AO与RNA的结合,其荧光发射峰为640nm,激发后呈红色荧光,少量结合会呈桔黄色或桔红色荧光。因此,吖啶橙嵌合到双链DNA分子中显绿色,与DNA单链或RNA结合时发桔黄色或橙红色荧光吖啶橙染色试剂盒( Acridine Orange Detection Kit)主要由Ao Stain、AO Stain Buffer组成,常用于细胞凋亡的检测。 |
吖啶橙荧光染色试剂盒
产品货号:R21805
产品规格:100T
产品简介:
吖啶橙( Acridine Orange,AO)属于三环杂芳香燃料,可以标记DNA、RNA,属于异染性荧光染料。该染料具有膜通透性,能透过细胞膜,使核DNA和RNA染色。因此AO常用于细胞内DNA和RNA进行检测。AO与核酸结合方式主要有:1、插入性结合,AO嵌入核酸双链的碱基对之间种结合方式主要为AO与DNA的结合,其荧光发射峰为530nm,激发后呈绿色荧光;2、静电吸引,带正电荷的AO与单链核酸的磷酸根(带负电荷)产生静电间的吸引结合,这种结合方式主要为AO与RNA的结合,其荧光发射峰为640nm,激发后呈红色荧光,少量结合会呈桔黄色或桔红色荧光。因此,吖啶橙嵌合到双链DNA分子中显绿色,与DNA单链或RNA结合时发桔黄色或橙红色荧光吖啶橙染色试剂盒( Acridine Orange Detection Kit)主要由Ao Stain、AO Stain Buffer组成,常用于细胞凋亡的检测。
染色后在荧光显微镜下观察,吖啶橙可透过正常细胞膜,使细胞核呈绿色或黄绿色均勻荧光;而在凋亡细胞中,因染色质固缩或断裂为大小不等的片断,形成凋亡小体。吖啶橙使其染上致密浓染的黄绿色荧光或黄绿色碎片颗粒;而坏死细胞黄荧光减弱甚至消失。吖啶橙染色常与EB染色合用双染,EB只染死细胞使之产生桔黄色荧光,由此可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。
试剂包装:
产品名称 | 100T | 储存条件 |
试剂(A): AO Stain | 500μl | 2-8℃,避光 |
试剂(B): AO Stain Buffer(10×) | 10ml | 2-8℃ |
自备材料:
1. 荧光显微镜
2. 低速离心机
3. PBS
4. 细胞计数板
5. 载玻片、盖玻片
操作步骤(仅供参考):
(一)AO单独染色
1. 收集细胞(采用流式细胞仪检测时,应先固定细胞),用AO Stain Buffer(1×)清洗细胞1次,加入适量的AO Stain Buffer(1×)重悬细胞,计数并调节细胞浓度至106/ml。
2. 取适量的细胞悬液和Ao Stain,按照细胞悬液: Ao Stain=19:1的比例混合,轻轻混匀。如果采用荧光显微镜下观察,一般取95μl细胞悬液和5μl AO Stain混合即可。
3. 室温避光染色15min,滴加于载玻片上并加盖玻片或上流式细胞仪分析。
4. 荧光显微镜下观察(激发滤光片波长488nm,阻断滤光片波长515nm),计数并拍照。
染色结果:
正常细胞 细胞被均匀染成黄绿色荧光
凋亡细胞 染色质浓缩,细胞核碎裂成点状,被染成大小与一、致密浓染的绿色颗粒
(二)AO/EB双染色
1. 收集细胞,用Ao Stain Buffer(1×)清洗细胞1次,加入适量的Ao Stain Buffer(1×)重悬细胞,计数并调节细胞浓度106/ml。
2. 取适量的细胞悬液和Ao Stain,按照细胞悬液Ao Stain=19:1的比例混合,并加人适量EB染色液,轻轻混匀。如果采用荧光显微镜下观察,一般取95μl细胞悬液和5μl Ao Stain混合即可。
3. 室温避光染色15min,滴加于载玻片上并加盖玻片。
4. 荧光显微镜滤光片515nm观察,计数并拍照。
染色结果:
正常细胞 均勻染成绿色荧光
坏死细胞 细胞桔黄色荧光
调亡细胞 染色质浓缩,细胞核碎裂,被染成大小不一、致密浓染的黄绿色 颗粒或见胞质芽状突起
注意事项:
1. 吖啶橙染色常与EB染色合用,可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。
2. 如有低温离心机进行离心效果更佳,同事应注意减少试剂暴露于强光下的时间。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:6个月有效。
产品介绍: