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产品基本说明：
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蛋白质含有三种含硫氨基酸：甲硫氨酸、胱氨酸和半胱氨酸（Cys）。其中，Cys是Γ一种含有巯基的含硫氨基酸，从甲硫氨酸转化而来，并且可与胱氨酸互相转化。Cys参与蛋白质二硫键的形成，经常是蛋白质活性中心的组成部分，还可以为其它生理生化反应提供巯基。此外，Cys大量积聚在皮肤和粘膜表面，在角蛋白生成中维持重要的巯基酶的活性，并且补充巯基，以维持皮肤的正常代谢，调节表皮Γ下层的色素细胞生成的底层黑色素。具有美白、解毒、改善炎症和过敏性皮肤等作用。 Cys还原磷钨酸生成钨蓝，在600nm处有吸收峰；通过600nm吸光度，计算Cys含量。 |
半胱氨酸（Cys）含量检测试剂盒（可见分光光度法）
产品货号：BA1047
产品规格：50管/48样
产品内容：
提取液：液体25mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体45mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存。用前1天，向试剂二中加5mL蒸馏水充分溶解，再加磷酸1.25mL混匀后盖紧（防止水分散失）沸水浴2h；冷却后加20mL 蒸馏水，4℃可保存2周。
标准品：粉剂×1支，10mg半胱氨酸。将标准品加入4.13mL蒸馏水得到20μmol/mL的标准液。4℃可以保存4周。
产品说明：
蛋白质含有三种含硫氨基酸：甲硫氨酸、胱氨酸和半胱氨酸（Cys）。其中，Cys是Γ一种含有巯基的含硫氨基酸，从甲硫氨酸转化而来，并且可与胱氨酸互相转化。Cys参与蛋白质二硫键的形成，经常是蛋白质活性中心的组成部分，还可以为其它生理生化反应提供巯基。此外，Cys大量积聚在皮肤和粘膜表面，在角蛋白生成中维持重要的巯基酶的活性，并且补充巯基，以维持皮肤的正常代谢，调节表皮Γ下层的色素细胞生成的底层黑色素。具有美白、解毒、改善炎症和过敏性皮肤等作用。
Cys还原磷钨酸生成钨蓝，在600nm处有吸收峰；通过600nm吸光度，计算Cys含量。
技术指标：
Γ低检出限：0.0053μmol/mL
线性范围：0.03125-3μmol/mL
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
低温离心机、可调式移液枪、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、磷酸和蒸馏水。
操作步骤：
一、半胱氨酸提取：
1、液体样品中半胱氨酸提取：取0.2mL液体样品，加提取液0.3mL，充分混匀，11000rpm4℃离心10min，取上清液，待测。
2、组织中半胱氨酸提取：称取约0.2g组织，加入提取液0.5mL，冰上充分研磨，11000rpm4℃离心10min，取上清液待测。
二、测定操作：
1. 可见分光光度计预热30min以上，调节波长到600nm，蒸馏水调零。
2. 标准液的配制：用蒸馏水将20μmol/mL的标准液稀释为2、1、0.5、0.25、0.125、0.0625μmol/mL浓度的标准溶液。
3. 按下表加入各试剂
试剂名称（μL） | 测定管 | 标准管 | 空白管 | |
样本 | 200 | |||
标准品 | 200 | |||
蒸馏水 | 200 | |||
试剂一 | 500 | 500 | 500 | |
试剂二 | 300 | 300 | 300 | |
混匀后室温静置15min，于600nm处测定吸光值。 | ||||
三、样品中半胱氨酸含量计算：
1、标准曲线的绘制：
以各标准溶液浓度为x轴，以∆A（A标准管-A空白管）为y轴做标准曲线，得到方程y=kx+b。 将（A测定管-A对照管）带入方程求x值。
2、半胱氨酸含量计算：
（1）按液体样本的体积计算
半胱氨酸含量（µ mol/mL）=x×V样总÷V=2.5x
（2）按鲜重计算：
半胱氨酸含量（µ mol/g质量）= x×V样总÷W=0.5x÷W
V：液体样本体积，0.2 mL；V样总：提取体系体积，0.5mL；W：样品质量，g。
注意事项：
如果测定吸光值超过线性范围吸光值，可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。
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