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产品基本说明:
超氧阴离子自由基作为生物体代谢过程中产生的一种自由基,可攻击生物大分子,如脂质、蛋白质、核酸和聚不饱和脂肪酸等,使其交链或者断裂,引起细胞结构和功能的破坏,与机体衰老和病变有很密切的关系,清除超氧阴离子自由基的研究已经得到了广泛的关注。 AP-TEMED系统产生超氧阴离子,与盐酸羟胺反应生成NO2-,NO2-与对氨基苯磺酸和α-萘胺的作用生成红色的偶氮化合物,在530nm处有特征吸收峰,样品对超氧阴离子的清除能力与530nm的吸光值呈负相关。 |
超氧阴离子清除能力检测试剂盒(可见分光光度法)
注意:正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。
产品货号:BA1069
产品规格:50管/48样
产品简介:
超氧阴离子自由基作为生物体代谢过程中产生的一种自由基,可攻击生物大分子,如脂质、蛋白质、核酸和聚不饱和脂肪酸等,使其交链或者断裂,引起细胞结构和功能的破坏,与机体衰老和病变有很密切的关系,清除超氧阴离子自由基的研究已经得到了广泛的关注。
AP-TEMED系统产生超氧阴离子,与盐酸羟胺反应生成NO2-,NO2-与对氨基苯磺酸和α-萘胺的作用生成红色的偶氮化合物,在530nm处有特征吸收峰,样品对超氧阴离子的清除能力与530nm的吸光值呈负相关。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。
产品内容:
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
提取液 | 液体50mL×1瓶 | 2-8℃ |
试剂一 | 液体2mL×1瓶 | 2-8℃,避光 |
试剂二 | 粉剂×1瓶 | 2-8℃,避光 |
试剂三 | 液体10mL×1瓶 | 2-8℃ |
试剂四 | 液体10mL×1瓶 | 2-8℃,避光 |
试剂五 | 液体10mL×1瓶 | 2-8℃,避光 |
溶液的配制:
1. 试剂二临用前临用前加8mL蒸馏水充分溶解。
需自备的仪器和用品:
天平、研钵、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、1ml玻璃比色皿、恒温水浴锅。
操作步骤:
一、样品处理
1. 组织:按照质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g,加入1mL提取液)加入提取液,冰浴匀浆后于4℃,10000g离心10min,取上清置于冰上待测。
2. 细胞:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后4℃,10000g离心10min,取上清置于冰上待测。
3. 培养液或其它液体:直接检测。
4. 粉剂药物可配制成相同浓度,比如1mg/mL。
二、测定操作
空白管 | 对照管 | 测定管 | |
试剂一(µL) | 40 | 40 | 40 |
试剂二(µL) | - | 160 | 160 |
H2O(µL) | 260 | 100 | - |
充分混匀,25℃反应1min | |||
样品(µL) | - | - | 100 |
试剂三(µL) | 200 | 200 | 200 |
充分混匀,37℃反应30min | |||
试剂四(µL) | 200 | 200 | 200 |
试剂五(µL) | 200 | 200 | 200 |
充分混匀,37℃显色20min,于1ml玻璃比色皿,以空白管调零,在530nm处测定对照管和测定管的吸光值,分别记为A对照管和A测定管。 |
注意:空白管只需测定一次。
三、计算公式
超氧阴离子清除率I%=(A对照管-A测定管)/ A对照管×100%
注意事项:
1. 试剂一4℃可保存2个月,配制好的试剂二4℃可保存一周,建议实验前配制,并尽快使用。
2. 样品处理完后立即进行测定,或者低温保存不超过24小时。
产品介绍: