SAINT-BIO/尚宝生物 BA1570 茶多酚（TP）检测试剂盒（酒石酸铁微板法）

茶多酚（TP）检测试剂盒（酒石酸铁微板法）

产品货号：BA1570

产品规格：100T

产品简介：

茶多酚(Tea Polyphenols，TP)是茶叶中多酚类物质的总称，包括黄烷醇类、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等，是一类儿茶素为主体的黄酮化合物，儿茶素占60~80%，具有C6-C3-C6碳骨架结构，是一种重要的天然抗氧化物质，能够清除自由基。类物质茶多酚又称茶鞣或茶单宁，是形成茶叶色香味的主要成份之一，也是茶叶中有保健功能的主要成份之一。研究表明茶多酚等活性物质具解毒和抗辐射作用，能有效地阻止放射性物质侵入骨髓，并可使锶90和钴60迅速排出体外。

茶多酚(TP)检测试剂盒(酒石酸铁微板法)检测原理是以酒石酸铁为底物，利用茶多酚与酒石酸铁反应，生成稳定紫蓝色化合物，以酶标仪540nm处测定吸光度，在一定范围内吸光度与颜色深浅的变化成正比，与标准曲线比较进而计算茶多酚含量，该试剂盒主要用于测定植物组织、血清等样品中茶多酚含量，尤其适用于测定茶叶中茶多酚含量。该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

产品组成：

自备材料：

1. 茶叶、绿茶等待测样本

2. 蒸馏水

3. 研钵、200目细胞筛

4. 离心管或试管

5. 水浴锅或电炉

6. 离心机

7. 96孔板、酶标仪

操作步骤（仅供参考）：

1. 准备样品：

①植物样品：取0.2g植物组织，研磨成粉末，加入煮沸的蒸馏水10ml，沸水浴浸提20min，用200目细胞筛过滤，滤渣再继续置于新的煮沸的10ml蒸馏水，相同操作提取一次，合并两次滤液，5000r/min离心15min，取上清液，即为茶多酚提取液。4℃避光保存，用于茶多酚的检测。绿茶等液体样本可直接用本试剂盒测定。

②血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可直接用本试剂盒测定。

③细胞或组织样品：取恰当细胞或组织裂解液，如有必要可用蒸馏水进行适当匀浆，5000r/min离心15min，取上清液，即为茶多酚提取液，4℃避光保存。

④高浓度样品：如果样品中含有较浓度的茶多酚，可以使用蒸馏水进行适当稀释。

2. 配制系列茶多酚标准：用蒸馏水和茶多酚标准(1mg/ml)，按下表进行操作，依次稀释。

3. TP加样：取96孔板，按照下表设置空白孔、对照孔、测定孔，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡。如果样品中的TP浓度过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定，样品的检测Γ好能设置2平行孔，求平均值。

4. TP测定：以空白调零，酶标仪测定540nm处标准孔、测定孔的吸光度。

计算：

以系列茶多酚标准浓度(1~6号)(20、50、100、300、500、800μg/ml)为横坐标，以对应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，求得回归方程。以测定管吸光度代入回归方程求得提取液中TP含量。

组织样本TP含量(μg/g)= (C×V _T )/(W×V _S )

式中：C=根据标准曲线求得提取液中茶多酚含量(μg/ml)

V_T =提取液的总体积(ml)

W=组织样本的重量(g)

V_S =测定时所用提取液的体积(ml)

液体样本TP含量(μg/ml)= (C×V_T )/ V_S

式中：C=根据标准曲线求得提取液中茶多酚含量(μg/ml)

V_T=提取液的总体积(ml)

V_S=测定时所用提取液的体积(ml)

注意事项：

1. 提取茶多酚时，注意提前煮沸蒸馏水，以便充分提取。提取液宜4℃避光保存。

2. 提取时间过长，茶多酚会发生氧化反应，导致测定结果不准确，建议2h内测定完成。

3. 如果没有分光光度计，也可以使用普通的酶标仪测定，但应注意酶标仪Γ大检测体积。

4. 每次检测指标不宜过多，否则操作时间不一，有可能导致样本间的差异。

5. TP显色液容易失效，建议4℃避光保存。

6. 采用分光光度计未调零情况下，空白参考值为0.102，100μg/ml参考值为0.265，一般情况下浓度在200~600μg/ml 时测定结果更准确。由于仪器设备、操作方法等不同，参考值会有差异。

7. 该试剂盒测定范围为10~1200μg/ml；以肉眼观察，浓度小于100μg/ml 几乎呈无色，浓度大于100μg/ml即可显淡紫蓝色，300μg/ml呈明显的紫蓝色。

有效期：3个月有效。4℃运输，4℃保存。