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产品基本说明：
| 脯氨酸(PRO)检测试剂盒(茚三酮微板法)检测原理是脯氨酸游离于磺基水杨酸溶液中，前者与酸性茚三酮共热发生反应，产生稳定的红色产物，以分光光度计测定520nm处吸光度值，在一定浓度范围内颜色深浅与脯氨酸浓度成正比。该试剂盒主要用于测定植物组织中的游离脯氨酸含量，仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。 |
脯氨酸（PRO）检测试剂盒（茚三酮微板法）
产品货号：BA1584
产品规格：100T
产品简介：
脯氨酸(Proline，Pro)是一种环状的α-亚氨基酸，呈中性，等电点为6.30，水中溶解度比任何氨基酸都大，25℃时100g水中可溶162g左右，易潮解不易得结晶，有甜味。脯氨酸与茚三酮溶液共热，生成黄色化合物，一旦进入肽链后，可发生羟基化作用，从而形4-羟脯氨酸，是组成动物胶原蛋白的重要成分，羟脯氨酸也存在于多种植物蛋白质中，尤其与细胞壁的形成有关，在正常情况下脯氨酸含量较低，但在逆境下(旱、热、冷、冻、盐碱等)，
常有脯氨酸的明显积累，即积累指数与植物的抗逆性有关，在临床、生物材料、工业等方面均有广泛应用。
脯氨酸(PRO)检测试剂盒(茚三酮微板法)检测原理是脯氨酸游离于磺基水杨酸溶液中，前者与酸性茚三酮共热发生反应，产生稳定的红色产物，以分光光度计测定520nm处吸光度值，在一定浓度范围内颜色深浅与脯氨酸浓度成正比。该试剂盒主要用于测定植物组织中的游离脯氨酸含量，仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
产品组成：
产品名称 | 100T | 保存条件 |
试剂(A): 脯氨酸标准(100μg/ml) | 1ml | 2-8℃ |
试剂(B): PRO Lysis buffer | 500ml | 2-8℃ |
试剂(C): PRO Assay buffer | 160ml | 2-8℃ |
试剂(D): 茚三酮 | 2支 | 室温，避光 |
试剂(E): 茚三酮稀释液 | 2×100ml | 室温 |
自备材料：
1. 蒸馏水
2. 研钵或匀浆器
3. 离心管或试管
4. 滤纸或纱布
5. 水浴锅
6. 甲苯
7. 96孔板
8. 酶标仪
操作步骤 (仅供参考) ：
1. 准备样品：
①植物样品：取新鲜植物组织，清洗干净，擦干，切碎，迅速称取0.5g，加入5ml PRO Lysis buffer 后匀浆或研磨，沸水浴10min(期间经常摇动)，混匀，用滤纸或纱布过滤，滤液即为脯氨酸提取液，4℃保存备用。
②血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定，-20℃冻存，用于脯氨酸的检测。
③细胞或组织样品：取恰当细胞或组织裂解液，如有必要用PRO Lysis buffer进行适当匀浆，留取上清即脯氨酸提取液，用于脯氨酸的检测。4℃保存备用，3天有效。
④高活性样品：如果样品中含有较高浓度的脯氨酸，可以使用PRO Lysis buffer进行恰当的稀释。
2. 配制茚三酮显色液: 取出1支茚三酮，准确溶解于100ml茚三酮稀释液，70℃加热搅拌至完全溶解，混匀，即为茚三酮显色液。4℃避光备用，48h有效。注意：茚三酮稀释液具有一定腐蚀性，请小心操作。
3. 配制系列脯氨酸标准溶液：取出脯氨酸标准(100μg/ml)恢复至室温后，按下表稀释：
加入物(ml) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
脯氨酸标准(100μg/ml) | 0.01 | 0.02 | 0.03 | 0.04 | 0.05 | 0.06 |
蒸馏水 | 0.09 | 0.08 | 0.07 | 0.06 | 0.05 | 0.04 |
脯氨酸含量(μg) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
4. PRO加样：按照下表设置空白管、标准管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡。如果样品中的脯氨酸浓度过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定，样品的检测Γ好能设置平行管。
加入物(ml) | 空白管 | 标准管 | 待测管 |
蒸馏水 | 0.1 | - | - |
系列脯氨酸标准(1~6号) | - | 0.1 | - |
脯氨酸提取液 | - | - | 0.1 |
PRO Assay buffer | 1.5 | 1.5 | 1.5 |
茚三酮显色液 | 1.5 | 1.5 | 1.5 |
混匀，沸水浴30min，溶液呈红色。 | |||
5. PRO测定：迅速冷却加入2ml甲苯，振摇30s，静置片刻，取上清液转移至新的离心管或试管，3000r/min离心10min，取上清液备用。将离心后的上清液200μl分别加至96孔板中，以空白管调零，酶标仪测定标准孔520nm处吸光度； 以甲苯调零，测测定管吸光度。
计算：
以系列脯氨酸标准(1~6号) 浓度(μg)为横坐标，以对应的吸光度为纵坐标，制作标准曲线，根据测定管的吸光度进而计算其脯氨酸浓度。根据如下公式计算具体样品中脯氨酸的含量：
植物组织样品 PRO(μg/g)=C×VT /(W×VS )
式中：C=从标准曲线上查得的脯氨酸浓度(μg)
V T =脯氨酸提取液总体积(ml)
W=样品鲜重(g)
VS =测定时加入提取液体积(ml)
血清、尿液等样品AA(μg/ml)=C×N/VS
式中：C=从标准曲线上查得的脯氨酸浓度(μg)
N=稀释倍数
VS =测定时加入提取液体积(ml)
注意事项：
1. 实验材料应尽量新鲜，如取材后不立即使用，应存于4℃。
2. PRO Assay buffer应密闭保存，防止挥发。
3. 如果没有酶标仪，也可以使用普通的分光光度计测定，但应考虑分光光度计的Γ小检测体积。
4. 所测样本的PRO浓度过高，应用PRO Lysis buffer稀释样品后重新测定。
有效期： 6个月有效。4℃运输，4℃保存。
产品介绍：
