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产品基本说明:
甘油三酯(Triglyceride,TG)又称三酰甘油,是3分子长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,是人体内含量Γ多的脂类,大部分组织均可以利用甘油三酯分解产物供给能量,同时肝脏、脂肪等组织还可以进行甘油三酯的合成,用酶学方法测定TG是生化检测中的常用方法,其特点是:1、灵敏度、准确度、精密度均高;2、使用温和的反应条件;3、操作简便;4、适用于自动分析仪。 甘油三酯(TG)检测试剂盒(单试剂GPO-PAP微板法)又称磷酸甘油氧化酶法或磷酸甘油氧化酶-过氧化物酶偶联法等,其原理是甘油三酯被LPL水解为甘油和脂肪酸,后者经甘油激酶和ATP磷酸化,G-3-P被磷酸甘油氧化酶(GPO)氧化并产生过氧化氢,再经过氧化物酶(POD)催化,使4-氨基安替比林与酚(三者合称PAP)反应,生成红色苯醌亚胺(Trinder反应),以分光光度计在500~520nm处进行比色测定,本试剂盒用于人或动物的血清、血浆、脑脊液、细胞、组织等样本中的甘油三酯含量定量测定。本试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。 |
甘油三酯(TG) 检测试剂盒(单试剂GPO-PAP微板法)
产品货号:BA1590
产品规格:100T
产品简介:
甘油三酯(Triglyceride,TG)又称三酰甘油,是3分子长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,是人体内含量Γ多的脂类,大部分组织均可以利用甘油三酯分解产物供给能量,同时肝脏、脂肪等组织还可以进行甘油三酯的合成,用酶学方法测定TG是生化检测中的常用方法,其特点是:1、灵敏度、准确度、精密度均高;2、使用温和的反应条件;3、操作简便;4、适用于自动分析仪。
甘油三酯(TG)检测试剂盒(单试剂GPO-PAP微板法)又称磷酸甘油氧化酶法或磷酸甘油氧化酶-过氧化物酶偶联法等,其原理是甘油三酯被LPL水解为甘油和脂肪酸,后者经甘油激酶和ATP磷酸化,G-3-P被磷酸甘油氧化酶(GPO)氧化并产生过氧化氢,再经过氧化物酶(POD)催化,使4-氨基安替比林与酚(三者合称PAP)反应,生成红色苯醌亚胺(Trinder反应),以分光光度计在500~520nm处进行比色测定,本试剂盒用于人或动物的血清、血浆、脑脊液、细胞、组织等样本中的甘油三酯含量定量测定。本试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
产品组成:
产品名称 | 100T | 保存条件 | |
试剂(A): GPO-PAP工作液 | GOOD` S buffer LPL、GK、GPO 过氧化物酶(POD) 4-氨基安替比林 对氯酚 | 30ml | -20℃,避光 |
试剂(B): Glycerol标准(1.7mmol/L) | 1ml | 2-8℃,避光 | |
试剂(C): ddH2O | 1ml | 室温 |
自备材料:
1. 生理盐水或PBS
2. 离心管、小试管或96孔板
3. 水浴锅或恒温箱
4. 分光光度计或酶标仪
5. 全自动或半自动生化分析仪
操作步骤 (仅供参考) :
1. 样本处理:
①血清、血浆、脑脊液样本:从待测样本中分离出的血清或血浆不应有溶血,直接检测,如超过线性范围,用生理盐水稀释后检测。
②细胞样本:
a、取适量的细胞(一般推荐>106以上),1000g离心10min,弃上清,留取沉淀。
b、用PBS或生理盐水清洗1~2次,1000g离心10min,弃上清,留取沉淀。
c、加入200~300μl的PBS或生理盐水匀浆,冰浴条件下超声破碎细胞,功率300W,每次3~5s,间隔30s,重复3~5 次。亦可手动匀浆,制备好的匀浆液不可离心;亦可用1~2% Triton X-100冰浴30~60min,制备好的裂解液不可离心。
③组织样本:准确称取适量组织样本,按质量(g):生理盐水或 PBS(ml)=1:9的比例,加入生理盐水或PBS,冰浴条件下手动或机械匀浆,2500~3000g离心10min,取上清待用。
2. 酶标仪TG测定操作:
①按下表依次加入试剂:
加入物(μl) | 空白孔 | 标准孔 | 待测孔 |
ddH2O | 3 | - | - |
Glycerol标准(1.7mmol/L) | - | 3 | - |
待测样本 | - | - | 3 |
GPO-PAP工作液 | 300 | 300 | 300 |
②充分混匀, 37℃水浴中孵育5min。
③分光光度计测定500~520nm吸光度,空白管调零,读取标准管和各待测管的吸光度。
3. 分光光度计(1ml比色杯)、半自动生化分析仪TG测定操作:
①按下表依次加入试剂:
加入物(ml) | 空白管 | 标准管 | 待测管 |
ddH2O | 0.01 | - | - |
Glycerol标准(1.7mmol/L) | - | 0.01 | - |
待测样本 | - | - | 0.01 |
GPO-PAP工作液 | 1 | 1 | 1 |
②充分混匀, 37℃水浴中孵育5min。
③分光光度计测定500~520nm吸光度,空白管调零,读取标准管和各待测管的吸光度。
4. 普通分光光度计(2ml 比色杯)TG测定操作:
①按下表依次加入试剂:
加入物(ml) | 空白管 | 标准管 | 待测管 |
ddH2O | 0.02 | - | - |
Glycerol标准(1.7mmol/L) | - | 0.02 | - |
待测样本 | - | - | 0.02 |
GPO-PAP工作液 | 2 | 2 | 2 |
②充分混匀, 37℃水浴中孵育5min。
③分光光度计测定500~520nm吸光度,空白管调零,读取标准管和各待测干的吸光度。
5. 全自动生化分析仪TG测定操作:
①按下表依次加入试剂:
加入物(μl) | 空白管 | 标准管 | 待测管 |
ddH2O | 3 | - | - |
Glycerol标准(1.7mmol/L) | - | 3 | - |
待测样本 | - | - | 3 |
GPO-PAP工作液 | 300 | 300 | 300 |
②充分混匀, 37℃水浴中孵育5min。
③全自动生化分析仪测定500~520nm波长处吸光度,以空白管调零,读取标准管和各待测管的吸光度。
机器参数:
主波长/次波长 500/600nm
反应类型 终点法
反应方向 升反应(+)
计算公式:
血清、血浆等液体样本( 空白调零) :
TG(mmol/L)={(待测管吸光度-空白吸光度)/(标准管吸光度-空白吸光度)}×1.7mmol/L
血清、血浆等液体样本( 全自动生化分析仪) :
TGmmol/L)=(待测管吸光度/(标准管吸光度)×1.7mmol/L
细胞、组织等样本(空白调零) :
TG(mmol/L)={(待测管吸光度-空白吸光度)/(标准管吸光度 -空白吸光度)}
×1.7mmol/L÷待测样本浓度(mg/ml)
细胞、组织等样本( 全自动生化分析仪) :
TG(mmol/L)=(待测管吸光度/(标准管吸光度)×1.7mmol/L÷待测样本浓度(mg/ml)
参考区间:
健康成年人 理想范围:<1.7mmol/L(<150mg/dl)
边缘升高:<1.7~2.25mmol/L(150~199mg/dl)
升高:<2.26~5.64mmol/L(200~499mg/dl)
很高:≥565mmol/L(≥500mg/dl)
性能指标:
外观 | 无色至淡黄色澄清液体 |
线性范围 | 0.05~9.0mmol/L(4~790mg/dl),R2 >0.98 |
灵敏度 | 检测下限0.05mmol/L(4mg/dl) |
变异系数 | 批内<5%,批间<8%,总误差<10% |
空白吸光值 | <0.2(1cm 光径) |
干扰因素 | 胆红素<205μmol/L;血红蛋白<6g/L;EDTA、肝素抗凝时,对结果无明细影响。 |
稳定性 | 密闭,6个月 |
注意事项:
1. 上述低温试剂避免反复冻融,以免失效或效率下降。
2. 本法可直接用于检测脑脊液中的TG含量,但不能直接检测尿液中的TG含量,因为未经处理的尿液中含有还原性物质,影响过氧化物酶反应。
3. 待测样本如不能及时测定,应置于2~8℃保存,3天内稳定。
4. 本法线性范围可达9.0mmol/L,如果样本TG浓度过高,结果可能呈假性降低,应用生理盐水稀释后重测,结果乘以稀释倍数。
有效期: 6个月有效。
产品介绍: