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SAINT-BIO/尚宝生物 BA1109 甘油三酯(TG)含量检测试剂盒(可见分光光度法)

用异丙醇提取TG,脂蛋白酯酶水解TG生成甘油和脂肪酸(FFA),甘油与三磷酸腺苷在甘油激酶和磷酸甘油氧化酶催化下生成H2O2,过氧化物酶催化过氧化氢氧化4-氨基安替比林偶联酚,生成有色化合物,在505nm处有特征吸收峰。
货号: T4512636
规格: 50管/48样
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价格:¥ 510.00 / 盒
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T4512636 50管/48样 SAINT-BIO/尚宝生物
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¥ 510.00 / 盒    当前项目  

  产品基本说明:

用异丙醇提取TG,脂蛋白酯酶水解TG生成甘油和脂肪酸(FFA),甘油与三磷酸腺苷在甘油激酶和磷酸甘油氧化酶催化下生成H2O2,过氧化物酶催化过氧化氢氧化4-氨基安替比林偶联酚,生成有色化合物,在505nm处有特征吸收峰。

甘油三酯(TG)含量检测试剂盒(可见分光光度法)

注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。

 

产品货号:BA1109

 

产品规格:50/48

 

测定意义:

TG是长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,不仅是细胞膜的主要成分,也是重要呼吸底物。

 

测定原理:

用异丙醇提取TG,脂蛋白酯酶水解TG生成甘油和脂肪酸(FFA),甘油与三磷酸腺苷在甘油激酶和磷酸甘油氧化酶催化下生成H2O2,过氧化物酶催化过氧化氢氧化4-氨基安替比林偶联酚,生成有色化合物,在505nm处有特征吸收峰。

 

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计、台式离心机、可调式移液枪、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

 

产品组成:

试剂一:液体60mL×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体26mL×1瓶,4℃保存。

试剂三:液体26 mL×1瓶,4℃避光保存。

 

TG的提取:

1. 组织中TG的提取:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)15~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆,8000g4℃离心10min,取上清,即TG待测液。

2. 细胞、细菌中TG的提取:先收集400-500万细胞或细菌到离心管内,离心后弃上清,加1mL试剂一,超声波破碎1min(强度20%,超声2s,停1s),8000g4℃离心10min,取上清,即TG待测液。

3. 血清(浆)样品:直接测定。

 

测定操作:

1. 可见分光光度计预热30min,调节波长到505nm

试剂(μL

空白管

测定管

样本


50

试剂一

50


试剂二

475

475

试剂三

475

475

2. 混匀,室温下静置20min,于505nm波长处读取吸光值,记为A空白和A测定,△A=A测定-A空白。空白管只需测一管。

 

计算公式

标准曲线:y = 0.6522x - 0.0199R2 = 0.9979x:标准品浓度(mg/mLy:吸光值差值ΔA

1. 血清(浆)中甘油三酯含量计算:

TG含量(mg/mL=ΔA+0.0199÷0.6522=1.533×ΔA+0.0199

2. 组织、细菌或细胞中甘油三酯含量计算:

(1)按样本蛋白浓度计算

TG含量(mg/mg prot= (ΔA+0.0199)÷0.6522×V÷(Cpr×V样)=1.533×ΔA+0.0199÷Cpr

(2)按样本质量计算

TG含量(mg/g鲜重)=ΔA+0.0199÷0.6522×V÷(W×V÷V样总)=1.533×ΔA+0.0199÷ W

V样:加入样本体积,0.01mLV样总:加入试剂一体积,1mLW:样本质量,gCpr:样本蛋白质浓度,mg/mL

 

注意事项:

1. 试剂盒中有易挥发性物质,实验过程中需佩戴手套和口罩,试剂瓶盖打开后应该及时盖紧。

2. Γ低检出限为100μg/mL

 




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